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制備型色譜柱選擇指南

時間:2021-02-02 點擊次數:656

很多小伙伴對選擇一根合適的制備柱而困擾,本文介紹了制備型色譜柱的一些選擇要點。

 

什么是制備型色譜柱

 

制備的目的是從混合物中得到純物質,即分離-純化-目標物,制備柱則是完成這一過程的工具。制備柱固定相種類和分析柱類似,制備柱的特點是:

1、柱長短,內徑大
為了加快分離時間和提高分離效率,制備色譜的進樣品量會很大,一般制備柱柱長為50mm-250mm,而內徑為10mm-50mm。

2、流速高
流動相流速一般在10-20ml/min,可以提高產率,降低生產成本。

如何選擇一款合適的制備柱


d一步:選擇合適的鍵合相
目前市場需求來看,蛋白質、多肽等類的物質分離純化十分普遍,其中以C18、C8、C4的鍵合相居多,月旭科技提供完整的鍵合相產品線。

 

 

第二步:選擇合適的填料粒徑和孔徑
根據化合物的性質來選擇合適的填料粒徑和孔徑
由分子量選擇合適的孔徑

由壓力耐受性和分離難度來選擇合適的粒徑

 

第三步:由上樣量大小和樣品特性選擇合適的柱管 

 

第四步:確定合適的流速和上樣量
制備柱的流速一般與直徑的平方成正比,舉例:4.6mm分析柱流速為1ml/min,則10mm制備柱約為4.7ml/min。


 

上樣量選擇過載上樣,特點是節約溶劑、節省時間、增加柱子的使用率,但是過載越多,分離度越差,一般以目標化合物與雜質分離度1.5為標準。上樣量可以依據下式計算:


 

Ultimate®系列制備柱


 

 

采用與分析柱所用填料完全相同,保證了分析規模和制備規模的良好重現性,支持直線放大;獨特的裝柱技術和全不銹鋼的modular柱管,保證了柱床的穩定性,經過測試10μm理論塔板數>35000/m,5μm理論塔板數>75000/m,峰的對稱性值為0.95~1.20;還有上樣量高、支持線性放大、制備時間短、節約溶劑等特點。
更好的柱效和封尾
 

 

更好的分離效率、易于線性放大
不同內徑的柱子能得到同樣完美分離
 

 

月旭科技擁有Sail 1000制備液相系統和Ultimate®,Xtimate® 制備色譜柱系列,小伙伴如果在選擇制備色譜柱過程中有什么疑問,歡迎咨詢月旭科技當地銷售代表和經銷商。

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